熒光PCR凍干保護(hù)劑-磷酸鹽

磷酸鹽是磷酸的鹽，在無機(jī)化學(xué)，生物化學(xué)及生物地址化學(xué)上是很重要的物質(zhì)。磷酸鹽是蛋白質(zhì)配方中常見的緩沖劑之一，特別是含水蛋白質(zhì)藥物，有效pH值范圍為5.8-8.0，并且具有生物相容性。然而，正如“冷凍過程中的pH變化”所討論的那樣，磷酸鹽緩沖液，特別是磷酸氫二鈉，在冷凍過程中會發(fā)生顯著的pH變化，因此不推薦用于pH敏感蛋白質(zhì)。相反，磷酸鉀，組氨酸，三羥甲基氨基甲烷(Tris)和檸檬酸鹽緩沖液在冷凍期間顯示出小的pH變化。此外，低緩沖液濃度可有助于降低pH變化。然而，選擇適當(dāng)?shù)睦鋬龈稍锼灾苿?，包括緩沖劑，取決于蛋白質(zhì)的要求及其給藥途徑。蛋白在凍干過程中存在許多應(yīng)力，包括低溫應(yīng)力、凍結(jié)應(yīng)力(枝狀冰晶的形成、離子強(qiáng)度的增加、pH值的改變、相分離等)、干燥應(yīng)力(失去蛋白質(zhì)表面水分子)等，這些應(yīng)力常常直接或間接導(dǎo)致蛋白質(zhì)類藥物失去天然構(gòu)象從而變性或失活。所以即使采用了冷凍干燥這種溫和的干燥方式，還需要加入合適的凍干保護(hù)劑。可選用的凍干保護(hù)劑：D-乳糖、D-甘露醇、白蛋白、葡聚糖、聚乙二醇、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、α-環(huán)糊精、吐溫80、甘油、二甲亞砜、乙二醇二乙酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、D-(+)-海藻糖。