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    實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng)

    發(fā)布時(shí)間:2020-07-17   點(diǎn)擊次數(shù):4268次

    實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)需要先制備混合反應(yīng)液,大劑量包裝的反應(yīng)試劑,使用前進(jìn)行分裝,盡量減少試劑的反復(fù)凍融。建議所有樣本要有三個(gè)重復(fù)。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程時(shí)需注意以下幾點(diǎn),有利于避免實(shí)驗(yàn)污染問題。1.用稀釋的漂白劑或凈化劑擦拭凈化臺(tái)。2.在的配有紫外燈超凈式或者超靜臺(tái)中準(zhǔn)備樣品,理想的是樣品的準(zhǔn)備與PCR的擴(kuò)增分開在不同的區(qū)域完成。3.在樣品制備和配制反應(yīng)過(guò)程中要勤換手頭。4.勤用稀釋的漂白劑擦拭移液器。5.只使用PCR級(jí)的水和PCR試劑進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)。5. 用帶旋蓋的 EP 管稀釋和配制反應(yīng)液。6. 在進(jìn)行 PCR 實(shí)驗(yàn)時(shí),還應(yīng)準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)模板的對(duì)照來(lái)驗(yàn)證有無(wú)污染發(fā)生,而且用熱啟動(dòng)酶防止反應(yīng)開始之前的非特異性擴(kuò)增。在選擇適合做熒光定量PCR試劑凍干的凍干機(jī)時(shí),,要具有完整的PAT控制技術(shù),可對(duì)凍干過(guò)程進(jìn)行完整的控制和分析監(jiān)控。包括預(yù)凍全過(guò)程控制、預(yù)凍結(jié)束判定、升華全過(guò)程控制、升華結(jié)束判定、解析全過(guò)程控制及凍干結(jié)束判定。板層溫度均一度±1℃。系統(tǒng)極限真空度±1Pa。系統(tǒng)真空泄露率<3Pa.L/S。外界干擾熱量屏蔽。共晶點(diǎn)測(cè)試儀助力工藝開發(fā)。全進(jìn)口配件。建議提高熒光PCR凍干的相關(guān)性。

    型號(hào)Pilot3-6T Pilot5-8T Pilot7-12T Pilot10-15T
    凍干面積0.42㎡0.56㎡0.84㎡1.05㎡
    ∅22西林瓶裝量(20ML)≥900支≥1170支≥1500支≥2100支
    ∅16西林瓶裝量(5ML)≥1700支≥2210支≥3100支≥4100支
    冷阱溫度(空載)-85℃
    真空度(空載)≤1Pa
    板層溫度(空載)-55℃
    板層制冷方式硅油循環(huán)
    板層數(shù)量3+14+14+15+1
    板層尺寸(mm)350*400350*400350*600350*600
    捕水能力6L8L12L10L
    凍干效率3L/24H5L/24H7L/24H10L/24H
    板層間距100mm80mm90mm100mm
    穿墻隔離
    凍干曲線擬合度100%100%100%100%
    晶型控制
    蒸汽分壓控制
    升華結(jié)束判定
    凍干終點(diǎn)測(cè)試
    壓塞液壓
    整機(jī)尺寸 (約)W860*D1400*H1800W860*D1400*H1800W860*D1700*H1900W860*D1700*H1900

     

     

     

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